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EliVisionTM plus/HRP免疫组化染色步骤

发布时间:2011-11-3 14:56:08

即用型非生物素免疫组化EliVisionTM plus/HRP检测试剂盒是根据聚合物技术将多个抗鼠和抗兔的lgG分子与辣根过氧化物酶结合在多聚物上,所形成的聚合物与一抗结合,从而放大了抗原抗体结合的信号。其染色步骤如下:
1、石蜡切片脱蜡、水化,自来水冲洗;
2、根据每一种抗体的要求,对组织进行相应的抗原修复;
3、如有必要(组织内含内源性过氧化物酶),切片上滴加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3次,每次三分钟(3×3分钟);
4、除去PBS液,切片上滴加第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,PBS冲洗3×3分钟;
5、除去PBS液,切片上滴加反应增强液,室温下孵育20分钟,PBS冲洗3×3分钟;
6、除去PBS液,切片上滴加酶标抗小鼠/兔IgG聚合物,室温下孵育30分钟,PBS冲洗3×3分钟;
7、除去PBS液,切片上滴加新鲜配制的DAB或AEC显色试剂显色;
8、自来水冲洗终止显色,苏木素复染(如有必要可用1%盐酸乙醇分化),PBS返蓝,如果用DAB显色,则切片经梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固,如果用AEC显色,则切片不能经乙醇脱水,而直接用水性封固剂封固。
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